使用生物凈化的方法可以保存優(yōu)良實驗動物品種
2020-05-14 22:19:03 admin
目前剖腹產(chǎn)代乳技術(shù)是建立清潔級動物群體或SPF 動物群體的唯一經(jīng)濟有效的方法，但是剖腹產(chǎn)凈化技術(shù)給遠交類型群體帶來了/ 瓶頸效應(yīng)0，數(shù)目過少會給基因帶來隨機的丟失[7] 。封閉群動物的凈化不同于近交系動物，要求能夠盡可能的保持現(xiàn)有的基因庫，使凈化前后生物學(xué)特性保持一致。因此，選擇待凈化小鼠時須保證他們來自不同的父母，且待剖的母鼠不能少于150 只?！ ?br />
實施子宮摘除術(shù)凈化小鼠實驗時，應(yīng)注意凈化鼠與代哺乳鼠的產(chǎn)仔時間。我們凈化的是湖北的封閉群KM 小鼠，而用做代哺乳鼠是來自北京的SPF級KM 小鼠。由于不清楚來自兩個地區(qū)的KM 小鼠是否可以同步產(chǎn)仔，我們采用SPF 級比普通級早2d、兩種小鼠同時配種、SPF 級比普通級晚2 d 的方法進行研究。從3 批手術(shù)結(jié)果來看，第三批，代乳鼠比待凈化鼠早2 d 配種，配種50 對，成功32 例，育成小鼠253 只，成活率64% 。效果最好; 第一批即兩種小鼠同時配種，成功18 例，育成小鼠150 只，成活率36%，效果次之; 第二批SPF 級比普通級晚2 d 配種，僅成功7 例，育成小鼠57 只，成活率為14%，效果最差?！ ?br />
我們認(rèn)為: KM 小鼠的配種時間應(yīng)該是哺乳鼠早于待剖鼠，因為產(chǎn)仔3~ 4 d 內(nèi)，母鼠對仔鼠的識別能力并不強，提早將代哺乳鼠準(zhǔn)備好，待凈化的仔鼠一旦被剖出來就有母鼠哺乳。第二批的效果不理想，就是因為當(dāng)時普通級動物已到了臨產(chǎn)期，而SPF級鼠中沒有現(xiàn)成的代哺乳鼠。另外基于KM 小鼠產(chǎn)仔數(shù)較多，代哺乳鼠應(yīng)該是待凈化鼠的2 倍，即剖得不滿10 只仔鼠可由1 只代哺乳鼠帶養(yǎng)，剖得10 只以上的可由2 只代哺乳鼠分別代養(yǎng)。本次我們將一次產(chǎn)10 只以上的仔鼠，只保留10 只，多余的棄去，本身就是一個損失?！ ?br />
采取子宮摘除術(shù)進行生物凈化小鼠時，由于漏診和不可能持續(xù)不斷進行手術(shù)，會有一些待凈化的孕鼠自然生產(chǎn)。補救方法是將這些小鼠分批進行凈化，對已生產(chǎn)的母鼠，在它的第2 或3 胎要認(rèn)真觀察避免漏診?！ ?br />
采用本文介紹的方法凈化小鼠，應(yīng)該特別注意無菌操作。超凈工作臺的處理應(yīng)在使用前用紫外線燈照射約1 h，每做完1 例手術(shù)后，用消毒液擦固定板，紫外燈照射5~ 10 min; 傳遞窗在使用前開燈至少2 h，并在手術(shù)過程中持續(xù)用紫外燈照射( 第二術(shù)者在取離體子宮時除外) ; 傳遞窗內(nèi)/ 滅菌渡槽0，在術(shù)前換掉平時放置的消毒水，換上新鮮用滅菌水配制成37 e 的2%的過氧乙酸溶液; 手術(shù)結(jié)束后，從手術(shù)區(qū)到繁殖區(qū)用消毒液擦拭、噴霧、拖地，以防污染。
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